Hur inaktiverar man trypsin?

Innehållsförteckning:

Hur inaktiverar man trypsin?
Hur inaktiverar man trypsin?
Anonim

När cellerna ser lossnade, lägg till 2 volymer förvärmt komplett tillväxtmedium för att inaktivera trypsin. Fördela försiktigt mediet genom att pipettera över cellskiktets yta flera gånger för att säkerställa återhämtning av >95 % av cellerna.

Hur stoppar jag trypsinaktivitet?

Trypsinnedbrytningen kan stoppas genom frysning eller genom att sänka reaktionens pH till under pH 4 genom att tillsätta myrsyra, ättiksyra eller trifluorättiksyra (trypsin kommer att återfå aktivitet när pH höjs över pH 4). Rötade prover kan förvaras vid -20°C.

Vad neutraliserar trypsin?

En buffert innehåller kalcium- och magnesiumjoner kommer också att bromsa trypsinaktiviteten. FBS är dock det effektivare sättet att hämma trypsinaktivitet.

Inaktiverar serum trypsin?

Serum inaktiverar kvarvarande trypsin från enzymatisk nedbrytning av njurarna och de proteolytiska enzymer som sedan syntetiseras av cellerna. Nyligen trypsiniserade celler kunde odlas till monolager i frånvaro av serum förutsatt att de tvättades upprepade gånger för att avlägsna resterande trypsin.

Hur mycket media krävs för att inaktivera trypsin?

Så länge du använder minst 1:1-förhållande av 5-10 % serum-innehållande medium med ditt trypsin bör det finnas mer än tillräcklig hämning, följt av centrifugering och medium utbyte med färskt medium.

Rekommenderad:

Intressanta artiklar
Varför globaliseras företag?
Läs mer

Varför globaliseras företag?

Globalisering låter företag hitta billigare sätt att producera sina produkter. Det ökar också den globala konkurrensen, vilket driver ner priserna och skapar ett större utbud av val för konsumenterna. Sänkta kostnader hjälper människor i både utvecklingsländer och redan utvecklade länder att leva bättre på mindre pengar.

Vad betyder foraminifer?
Läs mer

Vad betyder foraminifer?

Foraminifera är encelliga organismer, medlemmar av en filum eller klass av amöboidprotister som kännetecknas av strömmande granulär ektoplasma för att fånga mat och andra användningsområden; och vanligtvis ett yttre skal av olika former och material.

Vem har feberkramper?
Läs mer

Vem har feberkramper?

Feber - feberkramper En feberkramper är ett anfall eller anfall som uppstår hos barn mellan 6 månader och 6 år när de har hög feber. En feberkramper är inte epilepsi och ett kortvarigt anfall orsakar inte hjärnskador – inte ens ett långt anfall orsakar nästan aldrig skada.