Under de senaste åren använde Coriell allt värmeinaktiverat serum för sina cellkulturer för att inaktivera komplementproteinet som finns i serum från nyfödda kalv. Eftersom vi har bytt till fet alt bovint serum, finner vi att värmeinaktivering är inte nödvändigt för de flesta cellinjer.
Hur länge värmer du inaktivera FBS?
Följande protokoll föreslås för värmeinaktivering av fet alt bovint serum (FBS). FBS upphettas till 56± 2°C i 30± 2 minuter i omrörande vattenbad. Heat Inactivation (HI) – en process genom vilken FBS hålls vid en temperatur på 56± 2° i 30± 2 minuter.
Varför är värmeinaktivering nödvändig för FBS före användning?
En vanlig behandling av FBS är värmeinaktivering, där FBS värms upp till 56°C i 30 minuter i ett vattenbad med ibland skakning. Syftet är att inaktivera alla komponenter i komplementsystemet som finns i FBS [24], och andra potentiella okända hämmare av celltillväxt.
Varför behöver du värma inaktiverat serum?
Syftet med värmeinaktivering är att förstöra komplementaktiviteten i serumet utan att påverka produktens tillväxtfrämjande egenskaper. Avlägsnande av komplementaktivitet från serumet krävs inte för de flesta cellkulturer, men kan vara nödvändigt för kulturer som är känsliga för komplementaktiviteten.
Hur lagrar du värmeinaktiverad FBS?
Skydda upptinade FBS och andra sera med säker kylning ochlagring. Använd tinat serum omgående. Flytande FBS och annat serum kan förvaras i kyl (2 till 8 °C) upp till fyra veckor.