Densitometridata som genereras för Western-blottar används vanligen för att jämföra proteinöverflöd mellan prover. … Icke-linjära densitometridata observerades när Western blottar detekterades med infraröd fluorescens eller kemiluminescens och under olika SDS-PAGE-förhållanden.
Vad är densitometrianalys?
Densitometry är den kvantitativa mätningen av optisk densitet i ljuskänsliga material, såsom fotografiskt papper eller fotografisk film, på grund av exponering för ljus.
Hur använder du densitometri i bild J?
Densitometry med ImageJ
- Klicka i mitten av fyrkanten och dra den över till nästa körfält. …
- För det sista körfältet, upprepa proceduren men tryck på Ctrl och 3 för att ställa in det sista körfältet. …
- Använd linjeverktyget för att rita linjerna för att eliminera körfältsbakgrunden från beräkningarna. …
- Gå till: Analys→Gels→Label Peaks för att hämta rapporten.
Hur analyserar du Western blot-resultat?
Validera dina kvantifieringsverktyg . Kör till exempel en blöt där banorna är laddade med 20 µg, 15 µg och 10 µg tot alt protein. Efter analys bör den relativa kvantifieringen av målbanden vara 2, 1,5 och 1. Prova olika kvantifieringsverktyg och inställningar tills du tillförlitligt kan återskapa de korrekta resultaten.
Hur kvantifierar man en westernblot?
Steg 1: Bestäm bakgrunden subtraheraddensiteter av ditt protein av intresse (PI) och den normaliserande kontrollen (NC). Steg 2: Identifiera den NC som har det högsta densitetsvärdet. Steg 3: Dividera alla NC-värden med det högsta NC-densitetsvärdet för att få ett relativt NC-värde.
