Det är mycket viktigt att vara medveten om att data som produceras med en western-blot vanligtvis anses vara semikvantitativ. Detta beror på att den ger en relativ jämförelse av proteinnivåer, men inte ett absolut mått på kvantitet.
Är western blot kvalitativ eller kvantitativ?
Western blot är en tillförlitlig kvantitativ metod endast om provets egenskaper och integritet, antikroppsspecificitet mot målproteinet och laddningsprotokoll beaktas. Med noggrann uppmärksamhet på detaljer kan du undvika vanliga misstag och undvika att misstolka Western blot-data.
Vilken typ av metod är western blot?
A western blot är en laboratoriemetod som används för att detektera specifika proteinmolekyler bland en blandning av proteiner. Denna blandning kan inkludera alla proteiner som är associerade med en viss vävnad eller celltyp.
Kan western blot kvantifiera?
Western blots detekteras med antikroppar specifika mot målproteinet som är kända som primära antikroppar. … Det är dock också möjligt att använda Western blotting för att ge korrekt kvantifiering av proteiner i prover, för att bedöma förändringar i proteinuttrycksnivåer (2).
Kan western blot kvantifiera proteiner?
Efter lysering av celler är det viktigt att bestämma den totala proteinkoncentrationen i provet. Noggrann kvantifiering av provet gör att du kan laddarätt mängd protein i varje körfält.