Ladda kontrollantikroppar är viktiga kontroller eftersom de indikerar lika laddning av prover i alla brunnar. Laddningskontroller indikerar också korrekt överföring av proteiner till membranet under western blottingprocessen. Laddningskontroller är vanligtvis proteiner med högt och allestädes närvarande uttryck.
Vad gör en laddningskontroll?
En laddningskontroll är ett protein som används som kontroll i ett Western blotting-experiment. … De används för att säkerställa att proteinet har laddats lika i alla brunnar.
Varför använder vi en laddningskontroll i Western blot?
Ladda kontroller har en andra roll som kontroll i western blots. De kan användas för att kontrollera att det har skett en jämn överföring från gelén till membranet över hela gelén. Detta är absolut nödvändigt när jämförelser görs av proteinuttrycksnivåerna mellan prover.
Hur använder du laddningskontrollen i Western blot?
Signalerna från laddningskontroller används vanligtvis för att normalisera signalerna från proteinerna av intresse. För att använda en laddningskontroll för dessa ändamål bör detektion med kontrollproteinantikropp och den experimentella antikroppen göras på samma blöt. En mängd olika proteiner används som laddningskontroller.
Varför används aktin som laddningskontroll?
Beta-aktin, används vanligtvis som en laddningskontroll för Western Blot för attnormalisera nivåerna av detekterat protein genom att bekräfta att proteinbelastningen är densamma över gelén.
