Eftersom cellväggen är så resistent mot de flesta föreningar kräver syrafasta organismer en speciell färgningsteknik. Den primära färgen som används vid syrafast färgning, karbolfuchsin, är lipidlöslig och innehåller fenol, som hjälper fläcken att penetrera cellväggen. Detta understöds ytterligare av tillskottet av värme.
Varför krävs värme för syrafast färgning?
Uppvärmning av objektglaset hjälper till att mjuka upp det vaxartade materialet på bakteriecellväggen. Det vaxartade materialet är hydrofobt mot vattenlösning men inte mot fenollösning av basiskt fuchsin. Därför kan stark karbolfuchsin färga cellen. Vid färgning tenderar de att motstå avfärgning med 20 % H2SO4 (svavelsyra).
Hur syrafast färgning?
Instruktioner för syrafast färgning
- Lufttorka och värmefixera en tunn film av mikroorganismer. …
- Följ rutschkanan med Carbolfuchsin. …
- Flöd bilden med Acid Alcohol i 30 sekunder. …
- Motfärga genom att fylla objektglaset med metylenblått i 30 sekunder. …
- Torka objektglaset genom att sätta det mellan sidorna i en bok med uppslukande papper.
Kräver gramfärgning värme?
En gramfärgning utförs vanligtvis på ett utstrykspreparat som har värmefixerats. En funktion av fixering är att säkra (fixera) cellerna på objektglaset. I en biofilm är cellerna dock redan ordentligt fästa. Dessutom en värme fixeradobjektglaset är torrt, men en biofilm är mest vatten.
Vilken fläck kräver inte värme?
Det innebär applicering av en primär färg (basfuchsin), en avfärgningsmedel (syra-alkohol) och en motfärgning (metylenblått). Till skillnad från Ziehl–Neelsen-färgen (Z-N-färgning) kräver kinyoun-metoden för färgning inte uppvärmning.
