Produkten av restriktionssmältning kan enkelt lagras vid -20 C. Vid 4 C skulle det vara bra, men för att säkerställa att det inte finns någon aktivitet och ingen stjärnaktivitet är det rekommenderas att hålla den vid -20 C.
Hur lagrar du smält DNA?
Försök förvara gelskivan i kylen över natten, eller till och med smält skivan i buffert och frys in den vid -20°C eller -80°C. Nedbrytning av DNA kommer att ske med samma hastighet och under samma förhållanden som lösligt DNA, så använd en kallare temperatur för längre lagring.
Vad betyder det att en plasmid smälts?
Renat plasmid-DNA spjälkas med 1 eller fler restriktionsenzymer (REs) valda för att ge ett distinkt DNA-bandmönster som lätt löses upp genom elektrofores. … Restriktionsenzymer som skär inom det multipla kloningsstället (MCS) och resulterar i ett diagnostiskt mönster av 2-5 band som är lätta att lösa ut väljs vanligtvis.
Hur lagrar du linjäriserade plasmider?
Om du är orolig för nedströms effekter av TE, lagra DNA i en högre koncentration och späd vid behov, eller använd "låg TE" som är 10 mM Tris / 0,1 mM EDTA. när DNA eller RNA är rent kan det förvaras vid -20C i många månader utan någon nedbrytning.
Hur länge kan du behålla begränsningssammanfattningen?
Pro-Tip Beroende på applikationen och mängden DNA i reaktionen kan inkubationstiden variera från 45 minuter till över natten. För diagnostiska sammanfattningar är 1-2 timmar ofta tillräckligt. För smältning med >1 µg DNA som används för kloning, rekommenderas att du smälter i minst 4 timmar.
