Ju större molekylvikt, desto längre spolen och desto långsammare går molekylen. Så elektrofores + SDS separerar på basis av molekylvikt, inte på basis av naturlig laddning. Viktig anmärkning: Proteiner av samma längd kan vanligtvis inte separeras med gelelektrofores + SDS.
Hur separerar man proteiner med samma molekylvikt?
Centrifugering, elektrofores och kromatografi är de vanligaste teknikerna för att rena och analysera proteiner. Centrifugering separerar proteiner baserat på deras sedimentationshastighet, som påverkas av deras massa och form.
Vilka tekniker separerar proteiner på basis av laddning?
Proteiner kan separeras på basis av deras nettoladdning genom jonbyteskromatografi. Om ett protein har en positiv nettoladdning vid pH 7, kommer det vanligtvis att binda till en kolumn av pärlor som innehåller karboxylatgrupper, medan ett negativt laddat protein inte har det (Figur 4.4).
Vilken av följande tekniker är bäst lämpad för att separera proteiner baserat på molekylvikt?
Kromatografimetoder baserade på partition är mycket effektiva för separering och identifiering av små molekyler som aminosyror, kolhydrater och fettsyror. Men affinitetskromatografier (dvs. jonbyteskromatografi) är mer effektiva vid separation av makromolekyler som nukleinsyror och proteiner.
Vilken typ av kolumnkromatografi separerar proteiner på basis av molekylvikt?
Gelfiltreringskromatografi (GF) separerar proteiner enbart på basis av molekylstorlek. Separation uppnås med hjälp av en porös matris till vilken molekylerna, av steriska skäl, har olika grader av tillgång - dvs mindre molekyler har större tillgång och större molekyler exkluderas från matrisen.