Men när emissionsspektra överlappar, kan fluorescens från mer än en fluorokrom detekteras. För att korrigera för denna spektrala överlappning används en process för fluorescenskompensation. Detta säkerställer att fluorescensen som detekteras i en viss detektor härrör från fluorokromen som mäts.
Varför behöver vi kompensation i flödescytometri?
Kompensation krävs för ett flödescytometriexperiment på grund av fluorescensfysiken. En fluorokrom exciteras och emitterar en foton i ett antal våglängder. Några av dessa fotoner spills in i en andra detektor, vilket gör att enstaka färgade prover ser dubbelt positiva ut.
Vad är huvudsyftet med att använda en kompensationscell?
Det primära syftet är att tillåta mätning av den verkliga fluorescensen i den primära kanalen som är förorenad av spillover från närliggande fluoroforer. Därför korrigerar kompensation för fluorescens "intrång" mellan fluoroforer. Det är dock inte perfekt och kan inte fixa alla oönskade effekter.
Vad är kompensationsmatris?
En kompensationsmatris beräknas med hjälp av enfärgade fluorescerande kontrollfiler som samlas in på ImageStream eller FlowSight med alla kanaler insamlade och i frånvaro av ljusfältsbelysning eller SSC.
Vad är spektralkompensation?
Använder spektralkompensation innebär att signal från icke-primära detektorer fortfarande används för att förbättra den sanna signalen för markörer där det är möjligt. De primära kontrollproverna används för parameternamn. … Prover som används för primära detektorer hjälper också till att namnge dessa parametrar efter spektral kompensation.
